УДК 577.2 (470.621)

ББК 28.074 (2Рос.Ады)

С 71

Руденко К.А., Тугуз А. Р., Анохина Е. Н., Муженя Д. В.

Иммуногенетическая лаборатория НИИ комплексных проблем АГУ

СПЕЦИФИЧНОСТИ HLA DRB1 АССОЦИИРОВАННЫЕ С БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ У ЖИТЕЛЕЙ РЕСПУБЛИКИ АДЫГЕЯ

У жителей Республики Адыгея (доноров и больных БА) из 16 распространенных в мировых популяциях специфичностей HLADRВ1* типировано четырнадцать: *01; *02; *04; *07; *08; *09; *10; *11; *12; *13; *14; *15; *16; *17, однако с разной частотой идентифицированы всего 10 (*01; *04; *07; *08; *09; *11; *13; *15; *16; *17). С высокой частотой в контрольной группе выявлены две специфичности: DRB1*13 (0,277) и DRB1*15 (0,222). DRB1*13, обычно не превышающая 0,160 в мировых популяциях, исключение Литва (0,308) и США (0,255), у жителей Республики Адыгея выявляется значительно чаще.

Ключевые слова: ген, полиморфизм, бронхиальная астма, главный комплекс гистосовместимости, специфичность.

HLA DRB1 SPECIFICITIES ASSOCIATED WITH ASTHMA IN RESIDENTS OF ADYGHEA REPUBLIC

Of 16 HLA DRB1 specificities common in the world's population fourteen * 01; * 02, * 04, * 07, * 08, * 09, * 10, * 11, * 12, * 13, * 14, * 15, * 16, * 17 were taped in people of Adyghea Republic, but only 10 (* 01, * 04, * 07, * 08, * 09, * 11, * 13, * 15, * 16, * 17) were taped with different frequencies. Two specificities were taped in the control group with higher frequency: DRB1 * 13 (0.277) and DRB1 * 15 (0.222). DRB1 * 13, usually not exceeding 0.160 in world populations except Lithuania (0.308) and the USA (0.255) in the inhabitants of the Adyghea Republic, they are detected more often.

Keywords: gene, polymorphism, asthma, major histocompatibility complex, specificity.

Поиск ассоциаций главного комплекса гистосовместимости (HLA) с заболеваниями является новым направлением в клинической иммуногенетике, получившим название «HLA и болезни». Современными молекулярно-генетическими методами установлена высокая полиморфность HLA II класса, исследованы одно- и более нуклеотидные замены в структурах генов DRВ1, DQA1, DQB1, проявляющие высокую степень ассоциации специфичностей HLA с заболеваниями. [1]

Гены индивидуальности, локализованные в определенных регионах HLA (DRВ1), приобретают важное значение в выявлении наследственной предрасположенности или невосприимчивости к бронхиальной астме. Ассоциация специфичностей HLA DRВ1 с бронхиальной астмой не является универсальной, имеет этнические и региональные особенности распределения. [2]. Так, из 16 наиболее часто встречающихся специфичностей HLA DRВ1 с бронхиальной астмой ассоциированы 01-04; 07-17 специфичности: HLADRВ1*01 (Испания), HLADRВ1*02 (Австралия, Китай), HLADRВ1*03 (Норвегия, Италия, США), HLADRВ1*04 (Греция), HLADRВ1*05 (Корея), HLADRВ1*07 (Корея, Россия – Московская область), HLADRВ1*08 (Россия - Астраханская область), HLADRВ1*11 (США), HLADRВ1*13 (США), HLADRВ1*15 (Корея) [3,4]. Протективные к бронхиальной астме специфичности, так же как и ассоциированные, не одинаковы для разных стран: HLADRВ1*04 (Корея), HLADRВ1*06, HLADRВ1*09, HLADRВ1*14 (Китай) [3].

Данные по распределению HLADRВ1 - специфичностей и их роли в развитии бронхиальной астмы в РФ немногочисленны, имеют меж- и внутрипопуляционные различия, что обуславливает необходимость и актуальность региональных исследований.

Цель работы: Исследование частотного распределения для выявления протективных и ассоциированных с бронхиальной астмой специфичностей HLA DRВ1 у жителей Республики Адыгея.

Материалы и методы

Контингент обследованных лиц. В пилотное исследование включено 22 жителя Республики Адыгея, в том числе 9 доноров в возрасте от 22 – 38 лет, без клинических проявлений, наследственной отягощенности бронхиальной астмой и аллергических заболеваний; 13 больных пульмонологического отделения Адыгейской Республиканской клинической больницы (23-65лет) с верифицированным, согласно критериями GINA (2011), диагнозом бронхиальной астмы смешанного генеза.

DRB1 специфичности типированы на тест-системе HLA-ДНК-ТЕХ (НПФ ДНК-Технология, Москва) методом полимеразной цепной реакции с электрофоретической детекцией результатов. Образцы крови для ПЦР отобраны в пробирки с ЭДТА «VACCUETTE» (Австрия). Геномная ДНК выделена из цельной периферической крови доноров и больных с использованием комплекта реагентов «Проба-ГС-Генетика» (НПФ ДНК-Технология, Москва). Качество и концентрация образцов ДНК определена на спектрофотометре NanoDrop 2000c «Thermo Scientific» (США).

Статистический анализ результатов основан на определении значимых отличий с использованием χ² (кси - квадрата) с поправкой Йейтса, расчета показателей относительного риска – RR, этиологической фракции – EF (для RR>1), превентивной фракции – PF (для RR<1) [2].

Результаты исследования и их обсуждение

1. Анализ распределения специфичностей HLA DRB1 в обследованных группах населения Республики Адыгея в сравнении с мировыми данными. У жителей Республики Адыгея (доноров и больных) из 16 распространенных в мировых популяциях специфичностей HLADRВ1* типировано четырнадцать: *01; *02; *04; *07; *08; *09; *10; *11; *12; *13; *14; *15; *16; *17, однако с разной частотой идентифицированы всего 10 (*01; *04; *07; *08; *09; *11; *13; *15; *16; *17). В обследованных группах больных и доноров не выявлены *02, *10; *12; *14 специфичности, редкие и неравномерно распределенные в других мировых популяциях: минорная DRB1*02 специфичность не типируется и у других народов, а частота HLA DRB1*10 не превышает 2-10% в европейских и азиатских популяциях. DRB1*12 специфичность также встречается редко, в среднем с частотой от 0,016 до 0,073 (исключение Китай - 0,372). С очень низкой частотой (до 0,08) во всех изученных популяциях типирована HLA DRB1*14 специфичность.

Спектр и частотное распределение исследуемых вариантов HLA DRB1 в группах доноров и больных бронхиальной астмой имеет различия (табл.1). У доноров отсутствуют DRB1*04 и DRB1*08 специфичности, представленные в группе больных с хроническим воспалительным заболеванием органов дыхания.

 Таблица 1. Частоты HLA DRB1 специфичностей у доноров и больных с БА

* - RR (относительный риск); ** - PF- (превентивная фракция)

С высокой частотой в контрольной группе типированы две специфичности: DRB1*13 (0,277) и DRB1*15 (0,222). DRB1*13, обычно не превышающая 0,160 в мировых популяциях (исключение Литва (0,308) и США (0,255), у жителей Республики Адыгея выявляется значительно чаще [5,6]. По частоте DRB1*15 здоровые жители Республики Адыгея не отличаются от доноров целого ряда стран: США (0,230), Великобритании (0,285), Пакистана (0,209), Ирана (0,269), Швеции (0,290) [6 -10].

2. Протективные и ассоциированные с бронхиальной астмой специфичности HLA DRB1 у жителей Республики Адыгея. В результате проведенного исследования, направленного на выявление ассоциированных и протективных к бронхиальной астме специфичностей HLA DRB1 у жителей РА выявлены определенные закономерности. Наиболее часто типируемая DRB1*11 специфичность (0,192) у больных бронхиальной астмой, обнаруживается и в группе доноров с частотой 0,111, соответствующей распределению в других популяциях. Отсутствие достоверных различий у доноров и больных (χ² < 3,6; р >0,05) по частотам DRB1*11 специфичности не позволяет использовать его в качестве маркера, ассоциированного с астмой.

При сопоставлении типированных специфичностей в группах доноров и больных статистически значимые различия выявлены по DRB1*04 и DRB1*13. Присутствие DRB1*04 у больных с относительно высокой частотой (0,153) и практическое отсутствие её у доноров свидетельствует о возможной ассоциации с хроническими воспалительными заболеваниями легких.

В случае с DRB1*13 специфичностью наоборот, более высокая частота (0,277) выявлена в контрольной группе, а у больных бронхиальной астмой - 0,076 (χ²=4,050; RR= 0,145; PF=0,06), что позволяет рассматривать её в качестве протективной специфичности.

Выводы.

1. 1.В обследованных группах доноров и больных бронхиальной астмой с разной частотой типированы 10 наиболее распространенных в мировых популяциях специфичностей HLA DRB1 (*01; *04; *07; *08; *09; *11; *13; *15; *16; *17).
2. 2.У жителей Республики Адыгея DRB1*13 специфичность протективная, а DRB1*04 - ассоциированная с бронхиальной астмой

Литература:

1. 1.Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы / Под ред. Чучалина А.Г. — М.: «Атмосфера», 2012. — 104 с.
2. 2.Зарецкая Ю.М. Клиническая иммуногенетика. – М.: Медицина, 1983. – 208 с.
3. 3.Руденко К.А. Специфичности человеческих лейкоцитарных антигенов второго класса (HLA II), ассоциированные с риском развития бронхиальной астмы в мировых популяциях / К.А Руденко // Вестник Адыгейского государственного университета. 2012. №2. С 94 – 105.
4. 4.Андреева Е.Е. Особенности распределения генов HLA класса II у больных поллинозами: автореф. дис…. канд. мед. наук. Астрахань, 2011. 27 с.
5. 5.HLA class II alleles and haplotypes in Lithuanian children with type 1 diabetes and healthy children (HLA and type 1 diabetes) / Erika Skrodenienė [et al.] // Medicina (Kaunas). 2010. No. 8. P. 505-510
6. 6.The HLA Class II Allele DRB1*1501 Is Over-Represented in Patients with Idiopathic Pulmonary Fibrosis / Jianmin Xue [et al.] // Plos one. 2011. No.6. P.1-7.
7. 7.Sarcoidosis HLA class II genotyping distinguishes differences of clinical phenotype across ethnic groups / Hiroe Sato [et al.] //Human Molecular Genetics. 2010. No. 20. P. 4100–4111.
8. 8.Molecular analysis of human leukocyte antigen class I and class II allele frequencies and haplotype distribution in Pakistani population / T. Moatter [et al.] // Indian J Hum Genet. 2010 No 3. P. 149–153.
9. 9.Frequency of HLA-DRB1 alleles in rheumatoid arthritis patients in Zahedan, southeast Iran / Mahnaz Sandoughi [et al.] // Ann Saudi Med. 2011 No 2. P.171–173.
10. 10.Smoking and two human leukocyte antigen genes interact to increase the risk for multiple sclerosis / Anna Karin Hedstro¨m [et al.] // Brain. 2011. No. 134. P. 653–664.

_________________________________________________________________________________________________

Руденко Ксения Андреевна, аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 89615360272, e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Тугуз Аминат Рамазановна, доктор биологических наук, профессор кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 89184384418, e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Анохина Елена Николаевна, аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 89615276794, e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Муженя Дмитрий Витальевич, аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 89064351332, e-mail: Этот адрес электронной почты защищен от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Иммуногенетическая лаборатория НИИ комплексных проблем АГУ